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液相色譜儀的分離系統(tǒng)由色譜柱、色譜柱的連接部件、柱恒溫裝置和固定相等組成。一、色譜柱:液相色譜儀的色譜柱一般用內(nèi)部拋光的不銹鋼制成,柱內(nèi)徑為1~4mm,柱長(zhǎng)為10~50cm,柱形多為直形,內(nèi)部充滿微粒固定相。近年來(lái),由于高性能填充劑的細(xì)?;?,3~5um微粒填料的使用,趨向柱內(nèi)徑為...
高效液相色譜法的原理:高效液相色譜(HPLC)法是以高壓下的液體為流動(dòng)相,并采用顆粒極細(xì)的高效固定相的柱色譜分離技術(shù)。高效液相色譜對(duì)樣品的適用性廣,不受分析對(duì)象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機(jī)化合物中,可用氣相色譜分析的約占20%,而80%則需用高效液相色譜來(lái)分析。高效液相色譜和氣相色譜在基本理論方面沒(méi)有顯著不同,它們之間的重大差別在于作為流動(dòng)相的液體與氣體之間的性質(zhì)的差別。高效液相色譜法的構(gòu)造:可分為”高壓輸液泵”、”色譜柱”、"進(jìn)樣器”...
1、制備型加壓液相色譜,按照色譜柱和樣品量的大小,分為:(1)低壓液相色譜;(2)中壓液相色譜;(3)高壓液相色譜;2、低壓色譜(LPLC)柱壓一般低于5bar(或75psi)。低壓色譜一般是由蠕動(dòng)泵、進(jìn)樣閥和檢測(cè)器組成,可以連續(xù)化,實(shí)現(xiàn)自動(dòng)的梯度淋洗和餾分收集等操作。色譜柱管一般是玻璃或聚合物材料的,長(zhǎng)度一般為240-440mm,內(nèi)徑為10-40mm。對(duì)于大多數(shù)在紫外區(qū)有吸收的物質(zhì),光學(xué)檢測(cè)器很常用。填料一般使用軟質(zhì)的葡聚糖、瓊脂糖、纖維素、合成高聚物或離子交換劑,粒徑一般...
制備色譜是指采用色譜技術(shù)制備純物質(zhì),即分離、收集一種或多種色譜純物質(zhì)。制備色譜中的“制備”這一概念指獲得足夠量的單一化合物,以滿足研究和其它用途。制備色譜的出現(xiàn),使色譜技術(shù)與經(jīng)濟(jì)利益建立了聯(lián)系。制備量大小和成本高低是制備色譜的兩個(gè)重要指標(biāo)。其中,氣相制備色譜主要用于石油化工產(chǎn)品和揮發(fā)性天然產(chǎn)物的色譜純樣品制備。1、分析色譜的目的分析出混合物中一個(gè)(或者幾個(gè))純物質(zhì)的含量。制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質(zhì)。為了加快分離的時(shí)間與提高分離的效率,制備色譜的的進(jìn)樣品量很大,導(dǎo)致...
液相色譜理論發(fā)展簡(jiǎn)況色譜法的分離原理是:溶于流動(dòng)相中的各組分經(jīng)過(guò)固定相時(shí),由于與固定相(stationaryphase)發(fā)生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同,在固定相中滯留時(shí)間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。色譜法最早是由植物學(xué)家茨維特(Tswett)在1906年研究用碳酸鈣分離植物色素時(shí)發(fā)現(xiàn)的,Tswett用希臘語(yǔ)chroma(色)和graphos(譜)描述他的實(shí)驗(yàn),色譜法(Chromatography)因之得名。后來(lái)在此基礎(chǔ)上發(fā)...
制備色譜是以分離出純物質(zhì)為目的的色譜系統(tǒng),分析色譜是以分析出樣品組分信息為目的的色譜系統(tǒng),基于他們目的的不同,制備色譜相對(duì)于分析色譜有很多不同特征。制備色譜常用的色譜模式有低壓,中壓,高壓三種,以應(yīng)對(duì)不同類型和不同純度要求的樣品的分離,同時(shí)盡可能減少成本。低壓:一般而言,低壓適合易分離化合物,但分離時(shí)間長(zhǎng)很容易造成敏感化合物分解。中壓:中壓一般采用恒流泵提供恒定的流動(dòng)相流速,填料顆粒更小,分辨率更高,耐受更高壓力和更快流速。高壓:高壓通常在分離制備的后階段采用,應(yīng)用于分離困難...
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